產品特色：

1、本裂解液經過優化配方，在裂解紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細胞(lymphocyte) 或其它有細胞核的細胞；

2、本裂解液的主要有效成分為氯化銨；

3、本裂解液不適用于有細胞核紅細胞的裂解，例如鳥或禽類的紅細胞。

操作步驟：

對于組織細胞樣品：

1. 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當方法分散成細胞懸液，離心棄上清。

2. 加入 3-5 倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。例如 細胞沉淀的體積為1ml，則加入 3-5ml 的紅細胞裂解液。本步驟在室溫或4度操作均可。

3. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

4. 如果發現紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。

5. 洗滌 1-2 次：加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，重懸沉淀，400-500g 離心 2-3 分鐘，棄上清。可再重復 1 次， 共洗滌 1-2 次。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的 5 倍。4oC 離心效果更佳。

6. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。

對于組織細胞樣品（無洗滌）：

1. 新鮮組織經過膠原酶或胰酶等消化處理，通過適當方法分散成細胞懸液，離心棄上清。

2. 對于 0.2ml 細胞沉淀加入 1ml 紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。本步驟在室溫或 4oC 操作均可。

3. 加入 15-20ml PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，混勻。

4. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

5. 如果發現紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。

6. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。

說明：對于常規步驟，多一步洗滌過程中的離心，但可以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大體積的 離心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。

對于血液樣品：

1. 取新鮮抗凝血，400-500g 離心 5 分鐘，離心棄上清。

2. 加入 6-10 倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 1-2 分鐘。例如細胞沉淀的體積為 1ml，則加入 6-10ml 的紅細胞裂解液。本步驟在室溫或 4 度操作均可。

注意：對于鼠的血液，裂解 1-2 分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至 4-5 分鐘，并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。

3. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

4. 如果發現紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。

5. 洗滌 1-2 次：加入適量 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，重懸沉淀，400-500g 離心 2-3 分鐘，棄上清。可再重復 1 次， 共洗滌 1-2 次。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的 5 倍。4oC 離心效果更佳。

6. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。

注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在第一步中不進行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入 10 倍血液體積的紅細胞裂解液，并在室溫或 4oC 裂解 4-5 分鐘。對于鼠的血液，裂解 4-5 分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至 10 分鐘，但通常不宜超過 15 分鐘，并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續步驟相同。

對于血液樣品（無洗滌）：

1. 每 1ml 新鮮抗凝血中加入 10ml 紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解 4-5 分鐘。本步驟在室溫或 4 度操作均可。

注意：對于鼠的 血液，裂解 4-5 分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至 10 分鐘，但通常不宜超過 15 分鐘，并且裂解過程中宜適 當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。

2. 加入 20-30ml PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養液，混勻。

3. 400-500g 離心 5 分鐘，棄紅色上清。4oC 離心效果更佳。

4. 如果發現紅細胞裂解不完全，可以重復上述步驟 2 和步驟 3 一次。通常極微量的紅細胞不會影響后續的一些檢測。

5. 根據實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數等后續實驗。

說明：對于常規步驟，多一步洗滌過程的離心，但可以節省洗滌液的用量，并且洗滌效果也更好一些，同時不需要大體積的離 心管。快速步驟少了一次離心，但洗滌效果略差一些，同時需要大體積的離心管。