工作原理:
堿性條件下,蛋白將二價(jià) Cu 離子還原為一價(jià) Cu 離子,一價(jià) Cu 離子與 BCA 試劑形成紫顏色的絡(luò)合物,吸光度強(qiáng)度與蛋白濃度程正比。測(cè)定其在 562nm 處的吸收值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)比,即可計(jì)算出待測(cè)液體的蛋白濃度。
試劑盒性能:
1. 準(zhǔn)確靈敏,線(xiàn)性范圍廣,BCA 試劑的蛋白測(cè)定范圍是 20-2000ug/ml;
2. 快速:45 分鐘內(nèi)完成測(cè)定;
3. 經(jīng)濟(jì)實(shí)用:在微孔板中進(jìn)行測(cè)定,可大大節(jié)約樣品和試劑用量;
4. 穩(wěn)定:不受樣品中離子型和非離子性去污劑影響;
5. 檢測(cè)不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠(yuǎn)小于考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量。
注意事項(xiàng):
1.低溫或長(zhǎng)期保存,若發(fā)現(xiàn)BCA試劑中A或者B試劑有沉淀發(fā)生,請(qǐng)于37℃ 恒溫并攪拌促使其充分溶解,若發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染(如出現(xiàn)不可溶解的絮狀物 或沉淀)則應(yīng)丟棄,避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響;
2.不受大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響,可以兼容樣品中 5%的 SDS,5% 的 Triton X-100,5%的 Tween 20/60/80 等;
3.每次測(cè)量蛋白濃度均應(yīng)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn);
4.當(dāng)試劑 A 或者 B 混合時(shí)出現(xiàn)渾濁,請(qǐng)充分混勻,渾濁即會(huì)消失;
5.需準(zhǔn)備37℃水浴或恒溫箱、酶標(biāo)儀或普通分光光度計(jì),測(cè)定波長(zhǎng)為562nm (540-595nm 之間皆可);
6. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放普通住宅區(qū)。
7. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。