0.25%胰蛋白酶-EDTA 溶液說明書
產品名稱：0.25%胰酶溶液
貨號：H0518
規格：100ML
一、產品組成與性質
主要成分：胰蛋白酶（2.5 g/L）、EDTA-2Na（0.2 g/L）、酚紅指示劑，溶劑為 PBS 緩沖液。
理化性質：紅色澄清液體，pH 7.2-8.0，無菌處理，含低溫保存環境下 12 個月有效期。
二、操作步驟（以貼壁細胞為例）
預處理
棄去原培養基，用預溫的 DPBS 或無血清培養液洗滌細胞 1 次，去除殘留血清。
消化
加入適量胰酶溶液（如 75 cm2培養瓶加 5 ml），確保覆蓋細胞層，37℃孵育 1-3 分鐘。
顯微鏡觀察細胞收縮或邊緣卷起時終止消化（輕拍容器輔助脫落）。
中和與收集
加入含血清的完全培養基（體積≥胰酶量 2 倍）終止反應，吹打混勻后轉移至離心管。
1000 rpm 離心 5-10 分鐘，棄上清后重懸細胞并計數。
三、注意事項
消化控制
消化時間因細胞類型而異，敏感細胞（如原代細胞）需縮短時間或降低濃度至 0.05%。
無菌操作
避免反復凍融，分裝后-20℃保存；開封后建議 4℃短期存放并盡快使用。
溶液狀態
酚紅變色（如偏紫色）提示 pH 異常，需更換新鮮消化液。
特殊應用
含 EDTA 的溶液可能影響后續實驗（如流式檢測），可換用不含 EDTA 的胰酶。
四、儲存條件
未開封：-20℃避光保存，有效期 12 個月。
開封后：4℃保存不超過 1 個月，避免污染。
五、適用場景（注意事項：僅限科研用途，不可用于臨床）
貼壁細胞傳代（如腫瘤細胞、干細胞）。
單細胞懸液制備（用于流式細胞術、細胞分選）。
初生組織塊解離。
特別說明：
本產品含磷酸鹽體系，在低溫冷凍保存后溶液呈黃色。這是由于溫度導致溶液pH值發生變化，在正常解凍復溫后即恢復為紅色，不影響產品使用性能。可能會因某些原因（例如采用干冰運輸）導致溶液pH略微下降，從而使溶液顏色由紅色變成淺黃色。該種淺黃色的溶液依然可以使用，或者也可采用無菌的2M NaOH溶液對pH進行微調后使用。
