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SNU1079 細胞

產品貨號ALWS-0035(35)
產品規格T25
目錄價格 3000.00
产品信息
特點 1640+10%FBS(推薦 HAKATA 特級胎牛血清HB-FBS-500)+1%雙抗
特性 貼壁生長
優勢
產品詳情
一、貼壁細胞
1.75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養箱中進行 2-3
時的緩沖,
.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養液去掉,
再往其中加入 5-6mL 新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養,根據
細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代;
2.待細胞長滿瓶底面積 80%-90%,需要對其進行傳代,第一次傳代
比例為 1:2
3 傳代步驟:將 0.25%EDTA 胰酶置于 37°預熱,倒掉培養瓶中的
培養基,往培養瓶中加入 1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加 1ml
預熱好的胰酶,置于 37°孵育消化(第一次消化需時常取出置于顯
微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落
為最佳消化時間,記錄最佳消化時間,以便于下次消化),消化好
后加入 1ml 完全培養基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,
使之完全脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm 離心 3min,棄上清,
加入完全培養基重懸細胞,進行傳代。
二、懸浮細胞
1.75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,
輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉移到離心管中,然后 1200rpm
3min,去上清;
2.將離心好的細胞轉移至 T-25 瓶中,并加入 5-6mL 新鮮培養基,然
后將其置于細胞培養箱中培養,根據細胞生長狀況及培養基顏色變
化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養基);
3.顯微鏡觀察細胞數目比較多時,對其進行傳代,第一次傳代比例
1:2(離心后平均分成兩瓶培養)。
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